叶绿素含量检测|茁彩生物

叶绿素是绿色植物组织中的重要色素，它广泛存在于果蔬等植物的叶绿体中，与蛋白质结合形成复杂的结构。当植物细胞受损或死亡后，叶绿素会从叶绿体中游离出来，此时它变得非常不稳定，容易受到光、热等因素的影响而发生变化。在酸性条件下，叶绿素会失去镁离子，生成绿褐色的脱镁叶绿素;而在稀碱液中，叶绿素则可以水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。

高等植物中的叶绿素主要分为叶绿素a和叶绿素b两种，它们都具有相似的化学性质，易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿等有机溶剂。因此，在测定叶绿素的含量时，通常需要先提取出样品中的叶绿素，然后再采用适当的方法进行测定。

目前，叶绿素含量的测定方法主要有原子吸收光谱法和分光光度法两种。其中，分光光度法因其操作简便、灵敏度高而得到广泛应用。

分光光度法测定叶绿素的原理是利用叶绿素在特定波长下的吸收特性。叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处分别有最大吸收峰，且两者的吸收曲线在652nm处相交。因此，通过测定提取液在645nm、663nm和652nm波长下的吸光值，可以根据经验公式分别计算出叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素的含量。

叶绿素a含量(mg/g)=(12.7×A663 – 2.69 ×A645)×V提×D÷m÷1000 = 0.01×(12.7×A663 – 2.69 ×A645)×D÷m

叶绿素b含量(mg/g)=(22.9×A645 – 4.68 ×A663)×V提×D÷m÷1000 = 0.01×(22.9×A645 – 4.68 ×A663)×D÷m

叶绿素总含量(mg/g)=(20.21×A645 +8.02 ×A663)×V提×D÷m÷1000 = 0.01×(20.21×A645 +8.02 ×A663)×D÷m

V提：提取液体积，10mL;D：稀释倍数;m：样本质量，g