肿瘤标志物系列
肿瘤标志物
肿瘤标志物又称肿瘤标记物,是指特征性存在于恶性肿瘤细胞,或由恶性肿瘤细胞异常产生的物质,或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质,并能反映肿瘤发生、发展,监测肿瘤对治疗反应的一类物质。肿瘤标志物存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中,能够用免疫学、生物学及化学的方法检测到。
下表是肿瘤标志物相关指标:
肿瘤标志物研究相关因子 | |||
Antithrombin III | Endoglin | G - CSF | Leptin |
AFP | Endothelin-1 | He4 | MMP- 1 |
AXL | E - cadherin/CD324/CDH | HGF | MMP-2 |
BMP-9 | FGF- 1/FGF acidac | HCG | MMP-3 |
B7-H1/PD-L1 | FGF- 2/FGF basic | IL-2 | MMP-7 |
Catalase | FGFR4 | IL-4 | MMP-9 |
Cathepsin D | Follistatin | IL- 5 | MMP-10 |
CXCL12 | sFas | IL-8 | MMP-12 |
CA125 | sFasl | IL- 10 | MMP-13 |
CA15- 3 | UPA | IL- 12 | TIMP- 1 |
CA19-9 | ECM1 | IL- 13 | TIMP-2 |
CEA | TGF-B1 | IL- 17A | TIMP-3 |
CYFRA21-1 | Vitammin D binding protein | IL- 17F | TIMP-4 |
Coagulation factor X III | Vitronectin | IL- 18 | PSA |
Coagulation factor H(CFH) | EGF | IFN- Y | SCF |
样本收集方法
血清:全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。
血浆:抗凝剂推荐使用EDTA钠盐,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。
组织匀浆:用预冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9 mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000×g离心 5-10分钟,取上清检测。
细胞提取液:贴壁细胞用冷的PBS轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g离心5分钟后收集细胞;悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS 洗涤3次。每 1×106 个细胞中加入150-200μL PBS重悬并通过反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少PBS的体积)。将提取液于1500×g离心10分钟,取上清检测。
细胞培养上清或其他生物体液: 1000×g 离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
注意事项
血清,血浆,组织等常规样本用冻存管或者EP管-80°保存;
管盖密封,防止漏液;
记号笔做好标签,便于统计
多余样本自行备份
干冰运输
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