肥胖症系列
肥胖症
肥胖症是一组常见的代谢症群。当人体进食热量多于消耗热量时,多余热量以脂肪形式储存于体内,其量超过正常生理需要量,且达一定值时遂演变为肥胖症。
下表是肥胖症相关指标:
肥胖症研究相关因子 | |||
Adiponectin/Acrp3 | Glicentin | VEGF-A | IL-31 |
Adipsin/FactorD | Glucagon | IGFBP5- | MPO |
AaRP/ART | Total GL-P1 | IGFBP6- | MCP - 1/CCL2 |
Angiopoeitin-2(ANG-2) | Leptin | IGFBP7- | MCP -3/CCL7 |
ANGPTL4 | Leptin Receptor | IGF-1 | MIP - 1 β/CCL4 |
BDNF | LIF | IGF-1R | MIF |
sCD40L | Lymphotacin/CXCL1 | IL-1 α | MSP |
CRP | IGFBP-1 | IL-1 β | M-CSF/CSF1 |
Fas/TNFRSF6 | IGFBP-2 | IL-1Ra | NGF |
FGF - 6 | IGFBP-3 | IL-1R4/ST2 | OSM |
ENA - 78/CXCL5 | IGFBP-4 | IL-6 | OPG/TNFRSF11B |
HCC - 4/CCL16 | PAI-1 | IL-6R | TNF - α |
IFN - γ | Resistin | IL-8 | TECK/CCL25 |
IP- 10/CXCL10 | CCL-5/RANTES | IL-10 | TIMP- 1 |
Insulin | LDL | IL-11 | TIMP-2 |
SDF- 1/CXCL12 | Serum Amyloid(SAA) | IL-12p70 | sTNFR1/TNFRS1A |
样本收集方法
血清:全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。
血浆:抗凝剂推荐使用EDTA钠盐,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。组织匀浆:用预冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9 mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000×g离心 5-10分钟,取上清检测。
细胞提取液:贴壁细胞用冷的PBS轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g离心5分钟后收集细胞;悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS 洗涤3次。每 1× 106个细胞中加入150-200μL PBS重悬并通过反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少PBS的体积)。将提取液于1500×g离心10分钟,取上清检测。
细胞培养上清或其他生物体液: 1000×g 离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
注意事项
血清,血浆,组织等常规样本用冻存管或者EP管-80°保存;
管盖密封,防止漏液;
记号笔做好标签,便于统计
多余样本自行备份
干冰运输
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