败血型休克系列

 败血型休克

        败血症是指各种致病菌侵入血液循环，并在血中生长繁殖，产生毒素而发生的急性全身性感染。若侵入血流的细菌被人体防御机能所清除，无明显毒血症症状时则称为菌血症。败血症伴有多发性脓肿而病程较长者称为脓毒血症。致病菌通常指细菌，也可为真菌、分枝杆菌等。临床表现一般为急性起病、寒战、高热、呼吸急促、心动过速，以及皮疹、关节肿痛、肝脾肿大和精神、神志改变等。严重者可出现急性器官功能障碍，称之为重型败血症。病情进一步加重后可发展为感染性休克、弥散性血管内凝血(DIC)和多器官功能衰竭。

下表是败血型休克系列相关指标：

 样本收集方法

• 血清：全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。

• 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA钠盐，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。

• 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9 mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000×g离心 5-10分钟，取上清检测。

• 细胞提取液：贴壁细胞用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS 洗涤3次。每 1×10⁶ 个细胞中加入150-200μL PBS重悬并通过反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少PBS的体积)。将提取液于1500×g离心10分钟，取上清检测。

• 细胞培养上清或其他生物体液： 1000×g 离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 

 注意事项

• 血清，血浆，组织等常规样本用冻存管或者EP管-80°保存；

• 管盖密封，防止漏液；

• 记号笔做好标签，便于统计

• 多余样本自行备份

• 干冰运输

       我司所使用的检测试剂盒为“一步法”ELISA试剂盒，操作简单，节约时间，减少误差，本试剂盒由茁彩生物（ZCIBIO Technology Co.,Ltd）所提供。他们是一家专注于免疫检测类试剂的高科技生物公司，荣获2023年高新技术企业认证，有自主的品牌商标和相关专利，产品通过ISO9001质量体系认可，对每一批产品实行严格的质控，严格控制批间差和批内差，详情请查阅http://www.zcibio.com。