哮喘、肺气道炎症系列

 哮喘、肺气道炎症

        哮喘是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症为特征的异质性疾病，这种慢性炎症与气道高反应性相关，通常出现广泛而多变的可逆性呼气气流受限，导致反复发作的喘息、气促、胸闷和（或）咳嗽等症状，强度随时间变化。多在夜间和（或）清晨发作、加剧，多数患者可自行缓解或经治疗缓解。支气管哮喘如诊治不及时，随病程的延长可产生气道不可逆性缩窄和气道重塑。

下表是哮喘、肺气道炎症相关指标：

 样本收集方法

• 血清：全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。

• 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA钠盐，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。

• 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9 mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000×g离心 5-10分钟，取上清检测。细

• 胞提取液：贴壁细胞用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS 洗涤3次。每 1×10⁶ 个细胞中加入150-200μL PBS重悬并通过反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少PBS的体积)。将提取液于1500×g离心10分钟，取上清检测。

• 细胞培养上清或其他生物体液： 1000×g 离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 

 注意事项

• 血清，血浆，组织等常规样本用冻存管或者EP管-80°保存；

• 管盖密封，防止漏液；

• 记号笔做好标签，便于统计

• 多余样本自行备份

• 干冰运输

       我司所使用的检测试剂盒为“一步法”ELISA试剂盒，操作简单，节约时间，减少误差，本试剂盒由茁彩生物（ZCIBIO Technology Co.,Ltd）所提供。他们是一家专注于免疫检测类试剂的高科技生物公司，荣获2023年高新技术企业认证，有自主的品牌商标和相关专利，产品通过ISO9001质量体系认可，对每一批产品实行严格的质控，严格控制批间差和批内差，详情请查阅http://www.zcibio.com。